北京中科医院是治啥的 http://www.znlvye.com/
先来看一下检测项目和方法检测项目里，一方面就是抗体监测。目前主要用的是酶联免疫吸附试验，就是ELISA。通过抗体检测，一方面可以评估猪场的抗体水平，同时还可以判断猪场是否有野毒感染。表1展示了曾经为一家猪场做的蓝耳病抗体检测。针对蓝耳病，有些猪场在用疫苗，有些猪场没有用疫苗，所以检测到抗体之后，要进行综合分析：如果有抗体检出，要了解猪场的免疫情况，如果没有免疫过疫苗，有抗体检出，应该说猪场有感染，把它称为感染抗体，判断是否感染有经验值，S/P≥2.5就证实猪场有感染；如果说猪场免疫过疫苗，有抗体检出，应该就是免疫产生的抗体。表1某猪场蓝耳抗体检测结果表2是为猪场所做的伪狂犬抗体检测。对于伪狂犬抗体检测，目前我国有这么两类检测试剂盒，一是检测gB抗体，指的是免疫所产生的抗体，另外是gE抗体，主要指的是感染产生的抗体。目前我国用伪狂犬的基因缺失疫苗来进行免疫，与此同时可以检测gE抗体，如果说有gE抗体检出，就证实猪场中有伪狂犬野毒感染。表2-1伪狂犬gB抗体监测（免疫抗体）表2-2伪狂犬gB抗体检测gE抗体监测（感染抗体）第2个检测项目是抗原检测，可以用于疾病的诊断，包括流行病学调查，同时可以通过定量PCR检测方法对疫苗中抗原含量进行评价，比如有些猪场使用实时荧光定量PCR的方法来进行抗原含量检测。目前PCR的检测方法分为普通PCR和实时荧光定量PCR，如很多实验室自建的等温检测方法，包括LAMP以及重组酶介导的等温扩增（RPA），这两类方法敏感性比较高，但也会出现假阳性的情况。所以在临床中，普遍采用的是PCR和实时荧光定量PCR进行抗原检测。第3个，目前在检测过程中也可以做耐药性分析。耐药性分析主要通过药敏实验，为细菌病的防控来筛选敏感药物。可以用发病猪的组织涂抹相应的培养基，然后贴上药敏片，最后根据药敏片抑菌圈的大小来判定什么样的药比较敏感，也可以分离细菌来做药敏实验。第4个就是基因测序，目前在猪中用的最多的就是对蓝耳病病毒的测序。通过测序，可以分析蓝耳病病原的变异情况，从而在临床中筛选匹配的疫苗。大家知道，蓝耳病是在猪中危害比较大的传染病，从年传入我国之后，蓝耳病的毒株具有多样性。目前，在临床中主要有三个毒株，一是经典毒株，二是高致病毒株，还有类NADC30毒株。在蓝耳疫苗的使用过程中，有两类疫苗，经典毒株疫苗和高致病性毒株疫苗，到底该选择哪个？我的观点是这样的：可以根据猪场中蓝耳病的流行情况，选择相应的毒株，比如说猪场中主要发生和流行的是经典毒株，就可以用经典毒株的疫苗去免疫防控，如果流行的是高致病毒株，就可以选择高致病毒株的疫苗进行防控。因此有必要对它的基因进行分析，目前主要是分析NSP2以及GP5基因。以上是目前猪场或者检测机构主要开展的检测项目，以及使用的方法。针对这些项目，检测机构就有相应的平台，包括洗涤消毒室、病原学检测室、血清学检测室，另外还有分子生物学检测实验室，有些单位还有病理学检测实验室。依靠这样的平台，就可以从事血清学、细菌学、病毒学、分子生物学的检测，并能评估耐药风险，因此可以为猪场提供相应的服务。目前大多数检测机构，对常发的病，比如蓝耳病、圆环病毒、猪瘟、伪狂犬、细小、乙型脑炎等都可以进行检测。-以下是部分问答-问题1：现在非洲猪瘟全国泛滥，对于基层检测有什么更好的方式或者是什么样的建议？答：现在基层生产中由于缺乏相应的检测平台，所以这方面会有一定的困难，建议如果在生产中没有检测设备可以用检测试剂条进行初步的筛查，确诊就需要将收集的样本送到专业的实验室来进行检测。问题2：非瘟检测，一个样本的费用多少？答：对于病原检测目前用到的试剂盒有两大类：一是核酸类的检测试剂盒，另一个是检测卡。核酸的检测试剂盒包括PCR、实时荧光定量PCR两类，检测费用在元左右。抗体检测主要用的是酶联免疫吸附实验，样本的费用大概是30～50元。问题3：导致检测结果偏差的主要因素有哪些？答：猪场在送检的时候可能会把同样的样本送给2～3家或者更多的单位进行检测。关于检测误差有以下几个方面的因素：第一是与送检的样本有很大的关系，同一头猪采取样本的部分不同可能检出的结果就不同；第二是尽量送检到正规的检测机构来进行检测，如果自行检测，最好购买正规的检测试剂盒，来避免检测结果出现误差。问题4：检测伪狂犬中和抗体有什么意义？答：中和抗体是猪得到保护很重要的抗体，但在临床检测中对中和抗体检测的还不是很多。问题5：胶体金检测手段可信吗？答：胶体金指的就是检测卡，它的特点是快速，基本上5分钟就可以出结果，主要是基层或是现场的快速诊断。但是跟目前抗原检测类的比较起来，它的敏感性较差，不够准确。农业农村部在第1批所发布的非洲猪瘟中国检测试剂盒中曾经也做过比对实验，检测卡的敏感性在66%～67%。问题6：直接用组织做药敏试验科学么，会不会培养基中正常菌群占绝大部分？答：组织做药敏试验是目前药敏实验中很重要的方法，这种方法比较快，今天做明天就可以出结果。如果需要精准最好是用纯培养物来做，但在临床中涉及到要及时的防控，需要迅速出结果，建议选取有代表性的样品组织。药敏实验对培养基选择也是很重要的，需要给细菌培养提供充足的营养因子如血清等。问题7：检测结果的分析与临床脱钩如何指导生产？答：这个问题也是广大养殖户普遍关心的问题，就是送检结果可能跟他预想的可能不太一样。所以送检的样本一定要有代表性，送检的样本是有发病典型症状的猪2～3头，这样检测的结果准确度会高一些。问题8：如果怀疑猪感染蓝耳病，一般采集哪些病料比较适合检测？答：猪的淋巴结、脾脏、肺脏、肾脏都可以送检进行检测。另外目前有些新的技术也可以使比如唾液用于蓝耳病的检测。（资料来源：本文摘自河北农业大学动物医学院袁万哲教授，在年“伊科拜克·猪兜讲坛”第9期（总第37期）视频直播节目中分享的内容，由猪兜编辑部整理，供大家学习、参考。）

转载请注明:http://www.aideyishus.com/lkzp/6655.html